导读：上海中科院神经科学研究所李澄宇组近期在《科学》杂志发表了关于工作记忆机制研究的新成果。该研究运用和元生物Neuron品牌最新光遗传技术，特异性地只在“延迟期间”对小鼠内侧前额叶神经元进行电活动的上调或下调操作，充分体现秒级尺度的光遗传手段在研究工作记忆中的必要性。

10月24日，中科院上海生命科学研究院神经科学研究所李澄宇研究组在《科学》杂志发表了题为《内侧前额叶在“延迟期间”的电活动对工作记忆任务学习的贡献》的科研论文。这项研究通过干预“延迟期间”小鼠大脑内侧前额叶（mPFC）的电活动影响了记忆任务的学习正确率，阐明了该脑区在记忆学习过程中放电模式变化的规律。

“工作记忆”(working memory) 是一种重要的短时程记忆，它负责对“正在经历”的信息进行短暂的储存和运用。例如做心算时（17 X24 = ？），大脑需要在一个延迟期对不同位数进行符合运算规则的操作，而中间结果需要在记忆中被暂时存储下来，最后完成相应运算。又如在打电话时，如果被告知一个陌生号码，则需要在记忆中把这个号码暂时存储下来，然后将电话拨出。实际上，“很难找到一个不需要工作记忆参与的任务，使之成为智能认知的核心组件之一”。前人的研究表明，工作记忆的好坏和人类智商有相关性，工作记忆的缺陷也常在多种脑疾病和衰老过程中出现。

前人在研究中还发现，大脑的前额叶（额头后面的大脑区域）神经元的电活动对于工作记忆非常重要。但是，前额叶在工作记忆中的具体贡献机制，目前还是个重要的未知问题。具体的核心困难有两个：工作记忆是“秒”级的记忆，而传统的实验手段操纵神经元会造成长时程甚至永久性的影响，不能实现“秒”级的干预；此外，很多研究中用到的行为学范式无法区分记忆的存储与抉择等其他脑功能。

为了探究这个问题，李澄宇研究组训练小鼠学习一个工作记忆任务，其中记忆的存储与抉择行为在时间上相互分离（图A, B）。在这项任务中，小鼠先后闻到两个一样或者不一样的气味。如果气味不一样，小鼠可以舔水从而得到水作为奖励。小鼠在不做任务时是限制饮水的，因此水是一种奖励。如果气味一样，小鼠则需要抑制自己不去舔水。在闻到两次气味之间，有一段无气味的“延迟期”；而在这段时间里，小鼠需要记住第一个气味，然后才能和后面第二个气味作比较。这一任务的特点和优势就在于这一延迟期的设计，使小鼠无法做出抉择行为，从而可以特异性地研究信息的存储行为。

为了检测在“延迟期间”小鼠前额叶电活动对学习记忆任务的重要性，李澄宇研究组使用和元生物公司Neuron品牌 “光遗传”工具来开展该项研究。和元生物一直专注于光遗传方向的研究，并将在动物神经系统中应用十分广泛。采用的光遗传技术，结合遗传学和光学技术，可在复杂如自由活动个体的生物系统中实现定点的、快速的控制某一精确定义的生物学过程。这项技术通过在哺乳动物大脑神经元中表达微生物的感光蛋白，后通过对其进行光照调节神经细胞的兴奋性。这种调节是在秒级的时间尺度上，并且可以是双向的，即上调或下调其电活动。用光遗传手段，特异性地只在“延迟期间”对小鼠内侧前额叶的神经元进行电活动的上调或下调操作，都会使小鼠的学习正确率下降（图C）。有趣的是，一旦小鼠熟练掌握了任务，对电活动的操作就不能再影响完成任务的正确率（图C）。这一结果表明“延迟期间”前额叶的电活动对学习工作记忆任务有重要的贡献。

这一结果与前人的大多研究结果不同，也就是说前人多数的研究结果认为内侧前额叶皮层在工作记忆任务学会之后还是起作用的。为了解释这种表面上的矛盾，李澄宇研究组用光遗传手段在抉择期间操纵了神经电活动，观察到在学习后期和学会后确实有行为上的缺陷，从而表明前人的结果可能是因为用损毁或药理学等手段在操纵延迟期间神经元活动的同时还影响了抉择行为。这一结果还说明了用具有秒级尺度的光遗传手段研究工作记忆的必要性。

在接下来的电生理记录实验中，李澄宇研究组观察到神经元群体的放电强度在学习期间要比学会以后高（图D），对不同气味记忆的相关性电活动差异在学习期间比学会以后大，而这种差异和小鼠的学习成绩正相关。这说明在学习期间，内侧前额叶的电活动可以参与编码工作记忆的内容。

这些实验结果阐明了前额叶在延迟期间的电活动在工作记忆任务学习过程中的重要性，有利于理解工作记忆这一核心脑功能的机制。作为一个基础研究成果，还需要大量后续的持续性研究才能在改进人类的工作记忆及疾病中的应用等方面取得进展。

该课题由博士生刘鼎、顾晓炜、朱嘉通力合作完成，实验室的其他成员在实验实施过程中积极参与，都发挥了重要作用。本课题得到中科院百人计划、科技部973计划等项目的资助。

图注

(A)小鼠行为训练系

(B)工作记忆任务示意图。

(C)行为学和光遗传操作结果。行为正确率 =（正确 正确拒绝）/全部。每个点代表一组（session）训练的成绩，每天5组（共100 次，每组20次）。抑制工作记忆期间的神经元活动可以明显地降低学习期间的行为正确率（***），但是在完成学习后则不影响（n.s.）。

(D)内侧前额叶神经元在整个训练过程中群体电活动的变化。每一行代表一个神经元，颜色代表神经元电活动的放电频率（标准化后）。1～5秒是工作记忆期间。结果显示学习中记忆期间反应更强。