慢病毒 腺相关病毒
敲除细胞株构建

敲除细胞株构建

  Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(CRISPR)/Cas9是细菌和古细菌在长期进化而形成的一种适应性免疫防御机制,CRISPR/Cas9系统可以用于各种基因组的编辑。CRISPR/Cas9系统会通过小导向RNA(sgRNA)对切割区域进行识别,并利用Cas9内切酶实现在识别位点中间预测的位置切割,造成DNA双链断裂,在细胞进行易错修复后造成随机的突变。CRISPR/Cas9系统其突变效率高、灵活简单,周期短,成本低,已经被广泛的应用于基因编辑的研究。CRISPR/Cas9系统应用最多的领域是基因敲除株系构建和基因敲除动物的研究。

CRISPR/Cas基因组编辑原理
  公司可提供项目服务包括:CRISPR/Cas9实验方案设计、CRISPR/Cas9基因敲除载体构建、CRISPR/Cas9基因敲除载体病毒包装、CRISPR/Cas9基因敲除细胞株构建

服务特点:

1.定制特定基因敲除细胞系只需提供基因名称;
2.快速获得有效sgRNA,基因编辑效率高;
3.实验周期短;
4.可根据需要提供CRISPR/Cas9慢病毒包装服务

操作流程

1.靶向目的序列sgRNA的设计、载体构建及活性验证
2.目的细胞系共转染,初步筛选混合克隆
3.铺单克隆,单克隆筛选及鉴定细胞基因型
4.阳性细胞株的扩增
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