质粒（Plasmids）广泛存在于生物界，是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的遗传物质，具有自主复制能力，并表达所携带的遗传信息。
细菌质粒是闭合环状的双链超螺旋DNA分子，是目前基因治疗领域及疫苗制备中最重要的工具之一，其主要有三种应用形式：
1）直接体内注射，如DNA疫苗和裸质粒基因载体；
2）在体外转染改造靶细胞，如T细胞，然后回输体内；
3）在体外多质粒共转染细胞，生产病毒载体，如
腺相关病毒（AAV）和慢病毒（LV），继而用于体内或体外基因治疗。
无论裸质粒还是包装病毒载体，最终都是将质粒所携带的目的基因导入靶细胞并表达，进而达到治疗或预防疾病的目的。
高质量、高纯度的超螺旋DNA质粒是确保裸质粒、AAV、LV等基因载体安全性和有效性的前提条件。
和元生物自2017年开始研发质粒大肠杆菌高密度发酵工艺和大规模纯化工艺。目前已建立完善的平台化工艺、质量控制和质量保证体系，GMP车间配备有50-100L一次性不锈钢反应器，大规模层析和超滤纯化系统，每批生产可提供几十毫克至几克质粒，批次间质量稳定、纯度高、完全满足客户GMP级质粒载体的大规模生产需求。
质粒构建
服务
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产品 |
规格 |
交付 |
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1 mg |
1 mg/ml |
质粒DNA、菌株库；
可提供COA、批生产记录、批检验记录以及分析方法验证、稳定性研究等相关CMC材料，详情咨询。 |
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10 mg |
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50 mg |
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100 mg |
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200 mg |
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500 mg |
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1 g |
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5 g |
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… |
GMP质粒生产流程
工艺开发及中试生产流程
GMP生产流程
质检
菌种库检定（包含但不限于）
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大肠杆菌 |
检测项目 |
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原始种子、
主种子、
工作种子、
连续传代菌
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菌种同一性鉴定 |
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划种LB琼脂平板 |
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染色镜检 |
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对抗生素的抗性 |
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电镜检查 |
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生化反应 |
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质粒表达量 |
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质粒检查 |
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全质粒序列检查 |
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目的序列测序 |
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质粒丢失率 |
生产批质量放行
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检测类别 |
检测项 |
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鉴别 |
DNA测序 |
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限制性内切酶图谱鉴定 |
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琼脂糖凝胶电泳纯度 |
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纯度和杂质 |
超螺旋含量纯度 |
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质粒单体纯度 |
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A260/A280纯度 |
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大肠杆菌宿主蛋白残留 |
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大肠杆菌宿主DNA残留 |
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RNA残留量 |
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其他 |
外观 |
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pH |
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含量 |
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支原体 |
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内毒素 |
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无菌检查 |
周期
IND项目周期表
注：此为较完整IND项目周期表，可根据具体项目需求进行调整
优势
• 菌株库来源清晰，保证不同批次间质粒稳定生产；
• 为客户提供毫克至克级别的临床级质粒，保证高质量和高纯度；
• 杂质含量低，毒性小，保证质粒的安全性；
• 全程参考GMP标准进行质量监管，放行标准严格；
• 生产工艺成熟稳定，降低时间和生产成本。
